课程编号：02110552                       

课程总学时：32

课程学分：1

开课学期：秋季

开课单位：生物学院

适用专业：生命科学

所需先修课：植物生物学、动物生物学等

课程负责人：陈立群，王幼群

细胞生物学实验课程系细胞生物学课程的配套课程，开设对象为生物学院三年级和生命科学试验班二年级学生。通过实验课的开设使学生掌握细胞生物学的基本实验技术，了解从何着手研究细胞的生命活动。培养学生独立实验和独立思考的能力,提高学生观察分析问题的能力，树立严肃认真与实事求是的科学态度。本课程包括了细胞生物学的重要实验技术并体现了本学科的研究特点。主要内容包括光学和电子显微镜观察技术；细胞器的分离技术；细胞内化学组分的细胞化学定位技术、细胞培养以及细胞融合的诱导等细胞生物学常用基本技术。

实验目的: 了解普通光学显微镜、相差显微镜、暗场显微镜和微分干涉显微镜的构造、原理及其应用，熟练掌握其操作方法，应用于不同生物样品的观察。学习测微尺的用法并测量不同细胞的大小。

内容提要: 普通光学显微镜的原理、使用和细胞大小的测量；利用相差显微镜、暗场显微镜和微分干涉显微镜对各种生物样品进行细胞学观察。

实验类型：验证

实验室是否开放：否

实验目的: 掌握组织切片制备的原理和技术。

内容提要: 植物材料的固定、脱水、浸透、石蜡包埋、修块、切片、染色、封片和观察。

实验类型：综合

实验室是否开放：否

实验目的: 初步掌握荧光显微镜的使用方法及其在细胞生物学研究中的应用。

内容提要: 荧光显微镜的原理和使用；DAPI染色观察细胞核；苯胺蓝染色观察花粉管进入胚珠、筛管和胞间连丝。带有GFP融合蛋白材料的观察。

实验类型：验证

实验室是否开放：否

实验目的: 通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。了解离心机的原理和使用方法。

内容提要: 以差速离心法分离纯化叶绿体，在光镜下观察叶绿体的形态。

实验类型：验证

实验室是否开放：否

实验目的: 掌握细胞化学反应的原理和几种染色技术的关键步骤。

内容提要: Feulgen反应观察DNA在细胞中的分布和有丝分裂不同时相的特征。Brachet反应观察DNA和RNA在细胞中的分布。PAS反应观察多糖在细胞中的分布。Triton-x100处理、考马斯亮蓝染色光镜下观察植物细胞骨架。

实验类型：验证

实验室是否开放：否

实验六、透射和扫描电镜的样品观察（4学时）

实验目的: 学习和掌握透射和扫描电镜的基本构造、原理及其应用。

内容提要: 透射电镜下观察细胞的超微结构。扫描电镜下观察生物样品的表面形貌。

实验类型：验证

实验室是否开放：否

实验目的: 设计细胞融合实验，学习和掌握细胞融合的原理和方法。

内容提要：电诱导细胞融合，化学诱导细胞融合。

实验类型：设计

实验室是否开放：否

 

考核方式：每个实验后要求学生撰写实验报告，要求学生结合所学知识对实验结果进行分析。实验报告成绩占60%；操作能力占30%，；学生表现如出勤、是否遵守实验室规定占10%。

 

1、《细胞生物学实验指导》，王幼群等编写 自编

2、《细胞生物学实验》，杨汉民主编，高等教育出版社，1997，第二版.

 

执笔人：王幼群、陈立群

审定人：袁明，邵小明

2011年3月25日制订